化妝品功效評價方法之皮膚生理學檢測
皮膚生理學檢測(cutaneous biological test,CBT)是一種皮膚精細生理指標檢測體系。通常采用皮膚膠帶粘貼(tape stripping)的方法進行采樣,通過顯微鏡觀察、成分分析、免疫學檢測、多組學技術等,從皮膚表觀生理學到組織、細胞水平,再到蛋白、基因水平對采集的皮膚樣本進行多角度、多層面的原位測定,再依據相應皮膚生理學指標的變化,深入挖掘肌膚問題的成因和機制。皮膚生理學檢測為科學研究皮膚生理學以及化妝品功效評價提供了精準、全面和個性化的人體皮膚大數據支持。
角質層檢測
角質層位于表皮的最外層,由5~15層細胞核和細胞器均消失的扁平角質細胞及細胞間脂質構成,類似“磚墻結構”。
角質層采樣是用涂有黏性材料的膠帶、圓盤或者玻片粘貼皮膚,作用于表皮角質層的黏附力可使皮膚表面的鱗屑(即將脫落或已脫落的表皮角質層)脫落。通過對鱗屑的生理和病理學變化進行觀察,并分析鱗屑以及角質細胞的形態,以判斷皮膚的干燥或受損情況。
脂質檢測
角質層中的細胞間脂質由神經酰胺、膽固醇、游離脂肪酸以及其他脂質組成。研究表明,皮膚脂質的分泌過程以及主要組成成分的結構、含量或比例的變化,都會在一定程度上影響皮膚的屏障功能。
目前,脂帶法是用于提取皮膚表面脂質的常用方法,比較常用的膠帶是Corneofix?。將使用膠帶采集到的脂質溶解于一定比例的環己烷/乙醇溶液中,獲得脂質提取物,而后在氮氣條件下進行干燥,再通過氣相色譜儀等對角質層脂質的具體成分進行定性和定量分析。最后,可依據各脂質成分的比例,對皮膚屏障受損或恢復情況進行分析。
微生物檢測
皮膚微生物群、宿主皮膚以及外部環境相互作用,共同構成了皮膚微生態環境。其中,皮膚微生物群主要包括常駐菌群與暫住菌群。
常駐菌群是指長期定居于皮膚表面的菌群,不易被機械的摩擦清除,菌群的種類和數量因個體、環境的不同而不同。其中,常駐細菌主要包括葡萄球菌、微球菌、丙酸桿菌、棒狀桿菌和不動桿菌等,常駐真菌主要包括念珠菌、球擬酵母菌、表皮癬菌、小孢子菌和毛癬菌等。常駐菌群是皮膚菌群的主要成員,一般情況下不致病,而且還能夠幫助皮膚抵御外界刺激,對皮膚有一定的保護作用。常駐菌一旦脫離特定的環境,可能會導致皮膚疾病的發生。
暫駐菌是指皮膚在接觸外界環境后獲得的一類微生物,主要包括金黃色葡萄球菌、溶血鏈球菌和腸球菌等,是引起皮膚感染的主要病原菌。
拭子取樣是確定皮膚表面菌群種類的傳統方法。采樣技術的關鍵是要使用濕潤的棉簽對皮膚施加穩定的壓力,在30s內于采樣區域來回擦拭約50次。
通過研究皮膚表面菌群的變化以及與皮膚的相互作用,有助于了解微生物與肌膚問題的關系,從而進行針對性治療。例如,有研究表明,痤瘡丙酸桿菌可將甘油三酯水解為游離脂肪酸,游離脂肪酸又被氧化形成過氧化脂質,進而激活角質形成細胞的脂氧合酶,使IL-6等炎癥因子分泌增加,最終引發或加重皮膚的炎癥反應。
功能組檢測
功能組皮膚指標主要包括丙二醛、維生素E、天然保濕因子和黑素等。在對功能組皮膚指標進行檢測時,大多使用D-Squame?粘貼盤進行采樣,采樣后直接對膠帶進行染色,采用高效液相色譜法檢測膠帶上相應物質的含量,或通過圖像分析法進行物質定量。
(責任編輯:譙英固)
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